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电子显微硬度计观察上海金相镶嵌机壁微藻上海金相镶嵌机叶绿体玻璃珠转化 |
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电子显微硬度计观察上海金相镶嵌机壁微藻上海金相镶嵌机叶绿体玻璃珠转化 上海金相镶嵌机核与叶绿体转化技术 将新的遗传信息整合到上海金相镶嵌机核中能够实现重组蛋白的表达,以及对藻类代谢的调控,并且叶绿体的转化可以引起针对操控位点的结构重组,从而产生较高的表达水平。这是由于原生质体系的拷贝数较高,并且未被基因沉默。基因转化的基础是使上海金相镶嵌机膜产生短暂的渗透性,上海金相镶嵌机在保持活性的同时进行DNA分子的转移。转化在缺少上海金相镶嵌机壁的藻类(例如一些衣藻)中的应用已经取得一定的进展,这大大地增加了不可逆转化子的数量。反之,则需要在转化之前通过酶法去除上海金相镶嵌机壁。目前已经开发出了包括粒子轰击、根癌农杆菌介导的转化、玻璃珠振荡和电转化在内的多种方法。 粒子轰击法简单且重现性高,同时对于叶绿体的转化效率也非常高,因此是应用为广泛的一种方法。这种方法已经成功地应用于一系列藻类菌株的转化过程,其中包括莱茵衣藻、淡水绿藻、小球藻、雨声红球藻和三角褐指藻。 根癌农杆菌介导的转化主要用于工程化较高的植物上海金相镶嵌机。这种方法可以使来自根癌农杆菌肿瘤诱导质粒的T—DNA转化子进入目标基因组(Potvin et a1.2010),与玻璃珠转化法相比,其转化频率有效提高近50倍,并且已经应用于多种藻类物种,包括莱茵衣藻和雨生红球藻。 玻璃珠转化用于上海金相镶嵌机壁缺陷型微藻上海金相镶嵌机,操作方法为:在DNA、玻璃珠和聚乙二醇同时存在的条件下进行上海金相镶嵌机漩涡振荡,其中聚乙二醇用于提高转化频率。与粒子轰击进行上海金相镶嵌机核转化相比,玻璃珠振荡法是一种更为简单、便宜且十分有效的方法,并且经常用于上海金相镶嵌机壁缺陷型突变株的转化。 电转化法是将上海金相镶嵌机壁暴露在高强度电场内,通过脉冲诱导分子转运穿过质粒膜。它已经成功地用于许多具有生产生物燃料和植物化学品潜力的菌种。例如,拟微球藻、小球藻、杜氏盐藻D.salina、杜氏盐藻D.tertiolecta和莱茵衣藻。 重组蛋白的表达 在微藻中进行重组蛋白的表达和生产可以作为传统来源(植物上海金相镶嵌机)的替代途径,并且有望成为微藻生物技术的一项重要应用。这是因为微藻可以增强蛋白质折叠机制,并且微藻中存在翻译后的修饰系统以及快速的质体和上海金相镶嵌机核转化方法。而且与其他蛋白质表达平台相比,微藻重组蛋白的表达具有资本投入少和生产成本低的优点;
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