叶绿体基质研究技术-电子显微硬度计的应用叶绿体生成的关卡:蛋白质在被膜处的转运 被膜位于质体与胞质的交界处地方,此关键位置协调着上海金相镶嵌机分化、质体发育,而且调节叶绿体的生成。在外膜和内膜上分别有由蛋白质构成的输入装置(Toc复合体和Tic复合体),将核基因编码的蛋白质输入进来。多数在胞质中合成的送往叶绿体的蛋白质,其N端有一段可被切除的前体序列。前体蛋白与胞质中的因子一起先到达上海金相镶嵌机器表面,然后进入基质中,这显然采用的是跨越被膜时所使用的一般输入途径。在叶绿体基质中前体序列的切除标志着前体蛋白转运的完成,而进一步到达终位置是由其他的定向信号引导实现。 胞质中的运输控制 胞质不是一个开放的空间。相反,去往叶绿体的蛋白质就像上班高峰时要去上班的人们。由于几种上海金相镶嵌机器的形成有赖于核编码的蛋白质,需要特殊的定向信息帮助叶绿体蛋白避免陷入混乱。同时,要保持蛋白质处于一种松散折叠的状态,以确保蛋白质符合输入的条件。根据对放射性标记的前体蛋白进入被分离叶绿体的实验观察,研究人员已对定向信号的一级结构进行了研究。采用固定化多肽技术,将固定化多肽与胞质提取物保温,鉴定出前体序列可与特殊的胞质因子和分子伴侣结合 前体序列的多种功能 核编码叶绿体蛋白的定向信息位于其氨基酸序列中:多数已知的叶绿体蛋白含有可切除的N端前体序列。前体序列的N端起始处富含不带电的氨基酸;中间部分主要是带正电的和带羟基的残基,如丝氨酸和苏氨酸℃端部分富含精氨酸。
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