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相衬硬度计能观测透明的样品标本的光学原理 |
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透明的样品标本适合使用相衬硬度计的原理 相差显微术 一般硬度计之所以能看见样品的细节,是因为物体上反射出来的光线的波长(颜色)和振幅(亮度,包括它本身各部分细节与细节周围不同物质对光的吸收或反射程度)不同造成明暗的对比而形成的。 而观察无色透明的物体及其细节则较困难了,因为细节与背景一样亮。 一般是对物体进行染色后再观察。 但是有些样品一经染色就容易变形,甚至导致活体样品的死亡。 通过加强明暗对比(或将聚光镜遮掉一部分,造成偏斜照明),虽可看到物体但不能充分利用物镜的数值孔径,分辨率低,且亮度大减。 利用暗视野照明,虽可看到物体表面的反射光,但看不见内部细节及结构, 利用荧光显微术可以看到活体,但只限于能发射荧光的物体。 在这种情况下,可用相差/相衬硬度计来有效地观察透明无色的标本(细菌、细胞等生物活体),甚至还可以根据观察者的目的及标本的光学厚度来选择合适的反差。这是相差显微术的突出特点。
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