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| 纸上层析分离鉴定微量氨基酸分析鉴定硬度计 |
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纸上层析分离鉴定微量氨基酸分析鉴定硬度计氨基酸的分离和分析鉴定 蛋白质中氨基酸种类很多，为了研究蛋白质的组成和结构，以及制备和鉴定的需要，必须进行氨基酸的分离和分析鉴定工作。常用的方法很多，其中纸上层析和薄层层析法常用于氨基酸的分析鉴定方面，离子交换法常用于氨基酸的分离制备和定量测定方面。此外也常应用等电点、溶解度以及与专一试剂作用等方法来分离制备某些氨基酸。在分析鉴定上还有微生物法、酶化学法以及根据某些氨基酸的特殊基团的显色反应等。本节重点介绍纸上层析法和离子交换法。 纸上层析法 纸上层析是分离鉴定微量氨基酸简易有效的方法，一张滤纸，几十毫升溶剂，就可把仅有几个微克的混合氨基酸分开，并加以鉴定，既可作微量分离，又可作定性分析和定量测定。此法不仅应用于氨基酸，也广泛用在糖、核苷酸、有机酸、抗菌素等的分离鉴定上。 具体操作时，先将样品点在滤纸一端距纸边约2～3厘米处，然后将点有样品的一端浸入某一有机溶剂系统中，经毛细管作用使溶剂从纸的一端流向另一端，样品中的混合物也得以分离，滤纸干后再以适当显色剂或在紫外灯下观察所得的层析图谱，加以鉴定 纸上层析一般属于分配层桁，它白g基本原理主要是根据被分析的样品在二种不相混合的溶剂系统中的分配系数(即在二相中浓度比值)不同而达蓟分离的目的，相当于一个连续的反向液液抽提过程。纸上层析就是根据这原理，把一种溶剂固定在固体的支撑物上，称固定相，由于滤纸纤维对水有较强的亲和力，一般能吸着22％左右的水分，因此滤纸就是含有，固定相水的惰性支撑物，另一饱和了水的有机溶剂相(如饱和酚水、正丁醇一乙酸一水)为流动相，当流动相从含有氨基酸样品的滤纸上流过时，各种氨基酸就在这固定相和流动相之间连续不断的抽提分配，根据各种氨基酸在这三相中的分配系数不同，在纸上移动的速率也不同，当流动的溶剂移动到一定的前沿后，各种氨基酸就分别集中在滤纸的不同部位而被分开。
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