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| 荧光硬度计的物镜尽可能采用较大的数值孔径NA |
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荧光硬度计的物镜尽可能采用较大的数值孔径NA标本的特点为了增强荧光硬度计的使用效果，在设置荧光标本切片时，应具备以下特点： 载玻片应选用能透过短波紫外光的石英玻璃。厚度约为0．8—1．2mm。过厚的玻片吸收紫外光较多，而且对暗视场聚光镜效果有影响。载玻片应当光洁，无油迹，无划痕。 盖玻片宜采用镀膜玻璃。一般表面镀有氟化镁等若干层对不同波长的光起不同干涉作用的物质，这样可以透过荧光而反射激发光。反回的激发光能再次激发标本，增强荧光的能量。 标本取样不能太厚，尽量薄一些，散开要均匀，这样能使标本得到充分、均匀的激发。尽量减少标本重叠，互相掩盖，否则因激发不均匀，影响判断。 标本封载剂必须采用无荧光性能，无色透明的物质。通常使用分析纯甘油缓冲液，其中甘油体积90％，磷酸盐缓冲水10％，pH值为7．2—8．5。固定盖玻片时，可用含量1％的明胶水，盖上玻片后，以10％的福尔马林凝固。使用油镜观察时，注意不能使用普通的香柏油。因为香柏油在紫外光照射下有轻微荧光效应，干涉观察。此时可在香柏油中拌入适量的荧光熄灭剂如硝基苯，减少香柏油的荧光效应。有条件时，好使用纯檀香油，本身无固有荧光。用纯甘油缓冲液也可代用，但折射率略低一些，宜配用甘油浸液物镜。 对镜头的要求 为了提高荧光图像的亮度，荧光硬度计的物镜尽可能采用较大的数值孔径NA，同时，物镜和高倍目镜中，透镜胶合不能使用加拿大树脂胶。因为加拿大树脂胶主要成分冷杉树脂在紫外线光激发下会发生轻度的荧光效应，干扰观察效果。所以荧光硬度计所用镜头的透镜胶合，一般用聚乙烯醇一类的合成胶。这种镜头在普通硬度计均可应用。
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