|
|
|
细胞裂解之溶质浓度细胞壁检测生物硬度计 |
本站文字和内容版权为上海研润光学硬度计硬度计制造厂所有http://www.yr1718.net;转载请注明出处 |
细胞裂解之溶质浓度细胞壁检测生物硬度计 渗透裂解 细胞内的溶质浓度和膜压力一般来说是高于外界的,当外界浓度小于细胞内时,浓度梯度会使水流入细胞,反之亦然。只有水才能通过膜,如果没有支撑,细胞会因此静水压力引起的渗透震扰肿胀并破裂。 大多数的微生物都不能直接被渗透震扰作用,除非细胞壁提前经过酶作用或者在培养时抑制了细胞壁的合成。使用稀释的缓冲液或蒸馏水快速稀释(10~20倍)可以有效地裂解原生质球和原生质体,所产生的囊泡的大小取决于稀释的速度和程度。本方法通常将样品离心后得到原生质体或原生质球,再加入裂解液中进行裂解冻融法 冻融法可以提高革兰氏阴性细胞对溶菌酶和表面活性剂的敏感度,可用于对大批量膜或者亚细胞细胞器的分离中。 表面活性剂在细胞裂解中的应用 表面活性剂是一种既有亲水性又有憎水性的两性分子,在革兰氏阳性菌肽聚糖的完整性或革兰氏阴性菌外层膜被破坏的情况下,能够提供较温和的裂解方式。表面活性剂在选择性溶解细胞质膜(脂双层)的同时,可以保持外层膜的完整性,细胞便随之破坏:表面活性剂还可以用于除去核糖体、多聚核糖体和革兰氏阳性菌细胞壁中的膜污染:表面活性剂可使蛋白质变性,由于染色体和质粒DNA对机械方法中产生的流致压力很敏感,因此表面活性剂法也是普遍使用的细胞裂解方法之一
|
合作站点:
合作站点:
合作站点:
合作站点:
|
|