通型生物硬度计的放大倍数可达几百倍.一般真菌和酵母菌等微生物个体较大,用低倍物镜和高倍物镜即可得到良好的效果.但要看到经染色的细菌的形态和真核生物细胞的形态构造,好使用油镜头.

油镜比干燥系高倍物镜的工作距离短得多,短的只有0.1mm,且调焦程序又不同于干燥系物镜,操作时须特别细心,防止油镜压碎标本或损坏油镜.

由于细菌体积微小,故在细菌的形态学研究中,经常需要借助硬度计油镜,才能比较清楚地进行观察.因此,必须熟练地掌握油镜的使用及保护法.

（一）油镜头的识别：

各接物镜的放大率可由其外形辨认,镜头长度越大,镜片直径越小,放大倍数大；反之,放大倍数小.油镜头长度大于低、高倍镜,镜头下缘一般刻有一圈黑线或白线,并刻有100×、1.25或oil等字样.

（二）油镜的使用法：

1、使用硬度计油镜时,必须将硬度计端正直立桌上,不得将镜臂弯曲,使载物台倾斜,以免香柏油流溢,影响观察,污染台面.

2、调焦距：
A、转动粗调节器使载物台徐徐上升（或使镜筒渐渐下降）,直至油镜头浸没至油中.此时眼睛应从侧面观察,以免压碎标本片和损坏镜头.

B、将标本片放载物台上,用标本推进器固定,将欲检部分移至接物镜下.先用低倍镜找出标本的位置,然后提高镜筒,在标本的待检部位滴镜油一滴,再换油镜观察.

C、然后双眼移至接目镜,一面从接目镜观察,一面反方向缓慢地转动粗调节器（下降载物台,或上升镜筒）,当出现模糊物象时,换用细调节器,转动至物象清晰为止.

D、观察完毕,应先提高镜筒,并将油镜头扭向一侧,再取下标本片.油镜头使用后,应立即用擦镜纸擦净镜头上的油.若镜油粘稠干结于镜头上,可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头,并随即用干的镜纸擦去残存的二甲苯,以免二甲苯渗入,溶解用以粘固透镜的胶质物,造成镜片移位或脱落.

3、对光：

采用天然光为光源时,宜用平面反光镜；若用人工灯光时,则用凹面镜.

首先打开光圈,转动反光镜,使光线集中于集光器.可根据需要,上下移动集光器和缩放光圈,以获得佳光度.

一般用低倍镜或高倍镜观察物象或用油镜检查不染色标本时,需下降集光器并适当地缩小光圈,使光度减弱；若用油镜检查染色标本时,光度宜强.应将硬度计亮度开关调至亮,光圈完全打开,集光器上升至与载物台相平.

先在干燥系高倍物镜下找准被检物,并置于视野中央,然后升高镜筒约1.5cm,再把油镜头旋转至对准正下方.在玻片标本的镜检部位滴一滴浸液（镜头油）,将头偏于一侧观察,下降镜筒,到物镜的前透镜与浸液接触时停止.继而从目镜里细心观察视野,旋转粗准焦螺旋,使镜筒缓慢地上升,刚出现不太清晰的物象时就换用细准焦螺旋,至物象清晰后进行观察.

初次使用油镜,也可按照干燥系物镜的调焦程序调节焦距.即先下降镜筒至物镜接近盖玻片,但绝不能压在标本上,再上升物镜调焦.但此法有将浸液挤出去和造成空泡的缺点.若上调粗准焦螺旋时,镜筒已升到油浸镜头离开油滴,仍不能发现被检目的物,须重新调节.

油镜使用完毕,提升镜筒约2cm,把油镜转离光轴,先用擦镜纸擦去镜头上的大部分油,再用浸少量二甲苯的擦镜纸擦去镜头上的残余油迹,后用干擦镜纸擦去镜头上的二甲苯.擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周方向擦.玻片标本上的油也要进行清洁,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作三四次即可干净（如果是使用石蜡油,清洁时只用擦镜纸不必滴二甲苯）.

油镜使用的镜头油为香柏油或石蜡油.因香柏油黏稠度较高,使用之后擦拭较麻烦,因而许多人采用石蜡油代替使用.滴浸液时,要尽量避免气泡的形成,如果形成了气泡,可用解剖针尖将气泡排在一边,以免影响观察.

由于细菌体积微小,故在细菌的形态学研究中,经常需要借助硬度计油镜,才能比较清楚地进行观察.因此,同学们必须熟练地掌握油镜的使用及保护法.

油镜的使用原理：

油镜的透镜很小,光线通过玻片与油镜头之间的空气时,因介质密度不同,发生折射或全反射,使射入透镜的光线减少,物象显现不清.若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515）,则使进入透镜的光线增多,视野亮度增强,使物象明亮清晰.